Лабораторная диагностика инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барр

 

Вирус Эпштейн-Барра (ВЭБ) был впервые описан  в 1964 году Epstein, Achong и Barr при электронной микроскопии культуры лимфобластов полученных у больного лимфомой Беркитта. На основе морфологических признаков данный вирус был классифицирован как герпес вирус 4 типа. Этот вирус относится к подсемейству Gammaherpesvirinae рода Gymphocryptovirus. ВЭБ поражает в основном два типа клеток: эпителий верхних дыхательных путей и пищеварительного тракта, а также В-лимфоциты, которые в результате инфицирования иммортализуются.


Источником вируса является больной человек или носитель, вирус выделяется со слюной в продромальном периоде, в разгаре заболевания и рековалесценции в срок до 6 месяцев. Вирус во внешней среде стоек, поэтому заражение может  осуществляться воздушно-капельным и контактно-бытовыми путями. Показана возможность трансфузионной передачи ВЭБ от доноров с острой фазой первичной инфекции. Предполагается также трансмиссивный путь передачи вируса.Заболевание малоконтагиозно за счет наличия большого числа иммунокомпетентных лиц. Инфицирование обычно происходит в детстве или подростковом возрасте. В большинстве случаев первичная инфекция у детей протекает субклинически.


EBV синдром включает инфекционный мононуклеоз, а также опухоли типа карциномы, В-клеточной лимфомы. EBV может вызвать энцефалит у взрослых больных со СПИД и интерстициальный пневмонит у детей со СПИД.


Инфекция, вызванная ВЭБ может протекать в форме инфекционного мононуклеоза, характерными клиническими проявлениями которого являются боль в горле, лихорадка, спленомегалия, гепатомегалия и аденопатия. Клиническому проявлению инфекции предшествует инкубационный период длительностью 1 - 2 месяца. 90 - 95% случаев инфекционного мононуклеоза связано с EBV; остальные случаи связаны с цитомегаловирусом, Toxoplasma gondii, ВИЧ, аденовирусом или вирусом краснухи.Для заболевания характерна триада признаков: жар, боль в горле и лимфаденопатия. Во многих случаях, для того чтобы поставить диагноз, врачу-клиницисту приходится ожидать результатов лабораторных анализов, подтверждающих инфекционный мононуклеоз, так как схожие симптомы имеют многие заболевания.


После первичного заражения ДНК ВЭБ может встраиваться в геном В-лимфоцитов и реплицироваться вместе с ДНК клетки-хозяина, что является причиной латентной инфекции, которая может сопровождать человека на протяжении всей его жизни. Транзиторные иммунодефицитные состояния могут приводить к реактивации латентной инфекции.


Из серологических методов исследования используются различные модификации гетерогемагглютинации для выявления гетерофильных антител. Наиболее распространенной является реакция Пауля - Буннеля, в которой выявляются антитела к эритроцитам барана. (диагностический титр 1:32). Однако такие антитела могут выявляться и при других заболеваниях (ОРЗ, вирусные гепатиты и др.), что обусловлено наличием в эритроцитах барана F-антигена (антиген Форсмана). В процессе репликации вируса  экспрессируется свыше 70 различных вирусоспецифических белков, однако, к настоящему времени выделены группы наиболее иммуногенных белков, определение антител к которым дает возможность дифференцировать стадию инфекции.


EA (EarlyAntigen) - ранний антиген, включает белки р54, р138, соответственно диффузный (EA-D) и рестриктрирующий (EA-R) компоненты.


EBNA-1 (Epstein-BarrNuclearAntigen) - ядерный антиген, белок р72.


VCA(ViralCapsidAntigen) - капсидный антиген, включает комплекс белков р150, р18, р23; к настоящему времени показано, что иммунодоминантными белками в этом комплексе являются р18 и р23.

  • MA (Membrane Antigen) - мембранный белок, gh125 (BAKF4). Антитела к ядерному антигену вируса Эпштейна-Барр (EBV-EBNA). Появляются спустя недели или месяцы после начала болезни (на стадии реконвалесценции) и сохраняются всю жизнь (кроме лиц с иммунодефицитом).
  • Антитела к раннему антигену вируса Эпштейна-Барр (EBV-ЕA). IgG антитела к раннему антигену появляются через несколько недель после IgМ VCA и определяются от нескольких месяцев до нескольких лет после инфекции EBV.
  • Антитела к вирусному капсидному антигену вируса Эпштейна-Барр (EBV-VCA). Вирусный капсидный антиген EBV  является главным иммуногеном при первичном заражении. IgМ появляются на ранней стадии заболевания и через несколько месяцев исчезают. IgG появляются несколько позже и  сохраняются пожизненно.

Наиболее специфичными и чувствительными маркерами острой инфекции являются Ig G к раннему антигену (ЕА) и Ig M к капсидному комплексу (VCA) и  Ig G к EBNA-1.


Таблица 1. Иммунный ответ на разных клинических стадиях инфекционного мононуклеоза

Маркер

Острая фаза

Транзиторная фаза

Рековалесцентная фаза

VCA-Ig G

нарастают

персистируют на невысоком уровне

персистируют пожизненно на невысоком уровне

VCA-Ig M

присутствуют

Снижаются

нет или очень мало

EBNA-1 Ig G

нет или очень мало

начинают нарастать

персистируют пожизненно на невысоком уровне

EA Ig G

начинают нарастать

персистируют на невысоком уровне

персистируют пожизненно на невысоком уровне

гетерофильные антитела

присутствуют

Снижаются

нет или очень мало

Таблица 2. Интерпретация серологических данных

Период

VCA-Ig M

EA-IG G

EBNA-IG G

1

Инкубационный период или отсутствие инфицирования

-

-

-

2

Очень ранняя первичная инфекция

+

-

-

3

Ранняя первичная инфекция

+

+

-

4

Поздняя первичная инфекция

+/-

+

+/-

5

Атипичная первичная инфекция

+

-

_

6

Хроническая инфекция

-/+

+

-

7

Ранняя паст-инфекция

-

+

+

8

Поздняя паст-инфекция

-

-

+

9

Реактивация

+

+

+

10

Атипичная реактивация

+

-

+

 

Использована литература:


Бюллетень Лабораторной Службы №10, 2002 с. Лабораторная диагностика инфекции, вызванной вирусом Эпштайна-Барр, Заблоцкая С.Г., Шевченко Н.М., Ольховский И.А.